PMEC制药设备展了解到，研究人员研究出了一种通用的亲和（生物亲和）层析方法，该方法可通过紫外光进行重组蛋白纯化。
使用兴奋成像（光控单步蛋白质纯化）不需要这些过程中标准的竞争试剂或苛刻的缓冲条件。它在天然缓冲条件下便可运行，并可以以高通量方式运行。
偶氮苯基团化学品具有光开关形状和结合特性。能够在光照的生理缓冲液 soley 中从层析基质中特异性洗脱目标蛋白 （POI）。有结构的显着变化，因此，Pap 的偶氮苯部分与 α-CD 基质之间的亲和力。
PMEC制药设备展了解到，该方法中使用的光响应 Azo 标签由“含有 p-（苯基拉唑）-L-苯丙氨酸 （Pap） 的短肽组成，其侧链可以通过用温和的紫外线照射从其跨式基态切换到亚稳顺式构型”。
Azo 标签可以通过基因克隆轻松实现到 POI 中。能够一步纯化 POI，从复杂的生物样品或提取物中以相当或优于已建立系统的质量达到均一性。
色谱法分析
在研究过程中，该团队观察到分离效率很高。可以通过α-CD 基质对大多数细菌宿主细胞蛋白（或常见的代谢辅因子）或细胞培养蛋白缺乏背景结合活性来解释，这些蛋白在温和的缓冲液流下会迅速从色谱柱中冲出。
对于两种不同的颜色强烈的报告蛋白 mScarlet 和 Azurin，α-CD 亲和层析与 N 端和 C 端 Azo 标签相似，后者的性能略好。
PMEC制药设备展了解到，另一方面，N 端标记的 [超级文件夹 GFP （sfGFP）] 的光诱导纯化与其他 POI 相当，而带有 C 端 Azo 标签的 α-CD 亲和柱上的保留性大大降低。对于单体酶 AmpC，情况恰恰相反。
未来的潜在应用
Mayrhofer 等人表示，实现廉价 LED 器件的简单性应该会带来更智能的应用。
作者认为，根据研究结果，SPOT 巴氏肽筛选和 Azo 标签的情况，理论上在 POI 的 N 端和 C 端都起作用。因此，未来的潜在应用可以将 Pap 侧链暴露在蛋白质表面的其他位置，或作为融合蛋白中接头的一部分，前提是有足够的空间可及性。
该团队表示，激振成像的进一步应用范围从用于研究目的的台式一步蛋白纯化到微量滴定板中的自动化高通量筛选活动。Mayrhofer 等人表示，用例甚至可以达到使用允许内部照明的色谱柱设置，通过光导体，从色谱床内进行照明。
PMEC制药设备展基于分享行业资讯的目的转载本文章，不代表我公司支持文中所述的观点，也不为全文负责真实性，如有侵权，请及时联系我们予以删除。
